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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章人抑制素(INH)免疫組化試劑盒操作步驟

人抑制素(INH)免疫組化試劑盒操作步驟

更新時(shí)間:2021-11-11點(diǎn)擊次數(shù):670

人抑制素(INH)免疫組化試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

APOL6載脂蛋白樣蛋白6抗體

ARTS凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體

A2LD1A2LD1蛋白抗體

A4GNTα1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體

AADAC芳香乙酰胺脫乙酰基酶抗體

AADACL4芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4抗體

AASDHPPT氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉(zhuǎn)移酶抗體

AASS賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體

ANKRD6錨蛋白重復(fù)域6抗體

Arginase II精氨酸酶2抗體

AKR1C3醛固酮還原酶家族1成員C3抗體

ACTHR促腎上腺皮質(zhì)激素受體

AGRP褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體

Adrenodoxin腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體

AdracalinAllgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體

AAV5 capsid protein VP1腺相關(guān)病毒5 VP1抗體

ALDH3A2脂肪醛脫氫酶抗體

AVPR1A抗利尿激素1A抗體

AVPR1B抗利尿激素受體1B抗體

ARFGEF2二磷酸腺苷核糖基化因子鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子2抗體

ATBF1α增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體

ATXN10脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體

AKAP7蛋白激酶A錨定蛋白7抗體

ABCA12腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體

ABCB9腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體

ABCD4三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體

ABLIM3肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體

ACBD3高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體

ACACA乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體

ANT1+ANT2+ANT3+ANT4腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體

ADAM12去整合素樣金屬蛋白酶12

Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體

AX2R膜粘連蛋白2受體抗體


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