斑馬魚(yú)尾鰭細(xì)胞；AB.9說(shuō)明書(shū)【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱(chēng) 斑馬魚(yú)尾鰭細(xì)胞；AB.9說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性 
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性   
培養(yǎng)條件   
傳代方法 
傳代情況39
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類(lèi)

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

大豆慢生根瘤菌
人結(jié)直腸腺細(xì)胞英文名稱(chēng)：Caco-2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
固囊酵母 Trichoderma longibrachiatum
蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani
小鼠氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
香菇 Lentinula edodes
香菇 Lentinula edodes
30%丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(29:1)200ml國(guó)產(chǎn)
藤倉(cāng)赤霉 Gibberella fujikuroi
苜蓿中華根瘤菌
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞gersion
屎腸球菌 Enterococcus faecium
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng)：HUVEC
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum
小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
威爾酵母 Saccharomyces willianus
香菇 Lentinula edodes
Bacterial Protein Extration Kit/細(xì)菌蛋白抽提試劑盒25次、100次國(guó)產(chǎn)
粉擬青霉 Paecilomyces farinosus
人黑色素瘤細(xì)胞英文名稱(chēng)：M14N6-Cbz-L-Lysine benzyl ester hydrochloride    Nε-CBZ-L-賴(lài)氨酸芐酯酸    6366-70-7
4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic anhydride    六二酐    1107-00-2
2-CYANOETHYLTRICHLOROSILANE    三-2-碳硅烷    1071-22-3
2,2'-AZOBIS[2-(2-IMIDAZOLIN-2-YL)PROPANE]    偶氮二咪唑啉基丙烷    20858-12-2
phellodendrine    黃柏    6873-13-8
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside    5-溴-4-3吲哚基β-D 半乳糖    7240-90-6
alpha-Asarone    α-細(xì)腦    2883-98-9
TRIS[4-(PERFLUOROOCTYL)PHENYL]PHOSPHINE    三[4-(十七基)基]磷化氫    284472-92-0
(SP-4-2)-((2E,7R,11R)-3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecenyl (3S,4S,21R)-9-ethenyl-14-ethyl-13-formyl-21-(methoxycarbonyl)-4,8,18-trimethyl-20-oxo-3-phorbinepropanoato(2-)-N23,N24,N25,N26]-magnesium    葉綠素 B    519-62-0
Gomisin A    五味子醇    58546-54-6
AZOMETHINE H    亞胺-H    32266-60-7
Ethoxyethyne    乙氧基乙炔    927-80-0
Zinc iodide    碘化鋅    10139-47-6
2-Amino-3,5-dinitrothiophene    2-氨基-3,5-二基噻吩    2045-70-7
Astragaloside III    黃芪皂苷 III    84687-42-3
Iodopropynyl butylcarbamate    丁基氨基酸碘代酯    55406-53-6
NA    10X分子篩    
FLUOROTRIBROMOMETHANE    三溴烷    353-54-8