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當前位置:首頁產品中心分子生物學試劑探針標記及檢測1mgFluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)
產品簡介:

Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)公司正*的各種產品細胞半胱-4(CASPASE-4)活性熒光定量檢測試劑盒
組織半胱-4(CASPASE-4)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞半胱-5(CASPASE-5)活性比色法定量檢測試劑盒
組織半胱-5(CASPASE-5)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞半胱-5(CASPASE-5)活性熒光定量檢測試劑盒

產品型號:1mg

更新時間:2025-10-31

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Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針)

Fluo-4, AM

1mg

GOY-F10175

產品詳細介紹:

Fluo-2早是由Roger Tsien博士發明的鈣離子指示劑Fluo系列之一,目前,Fluo-3Fluo-4已成熟商品化。然而,Fluo-2在細胞內比Fluo-4要更明亮,主要可能是由于大部分細胞對FLuo-2的加載能力要高于FLuo-4。

Fluo-3成像涉及到鈣離子信號通路的多個方面,Fluo-3經常應用在流式細胞術上,如螯合劑光活化、第二信使、神經遞質以及細胞水平的藥理篩選。Fluo-3在這些應用里之所以能大量運用主要是由于其幾個重要特性:Fluo-3可以被氬離子激光器488nm激發,并在與Ca2+結合后,發射熒光很明亮的熒光信號。Fluo-4Fluo-3以兩個氟原子取代氯原子的類似物,這一微小的結構變化使得Fluo-4探針在488nm激發光下的熒光信號得到增強,信號穩定持續,可以應用于共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、微孔板讀數儀。

Fluo-2Fluo-3Fluo-4在與Ca2+結合后熒光增強,與紫外激發的探針fura-2indo-1不同,不會發生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結合后,增強至少100倍。

濃度:1mM in無水DMSO

儲存:-20℃,避光,有效期12個月。

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(
在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.
單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNADNA污染。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7.
把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔合酶   英文名稱:   Rabbit Total Niic Oxide Syhase   規格:   48T/96T   英文縮寫:   T-NOS  Albendazole  中文名:  分子式:C12H15N3O2S  度:98.5%

兔合成酶(NOS)ELISA試劑盒     5-O-Ethylcleroindicin D  488138-32-5  中文名:  分子式:C10H16O4 

兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γelisa試劑盒   兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒   規格型號:96T/48T   兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ試劑盒、兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile  中文名:  分子式:C15H19N3O5 

兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit                 Acyclovir  中文名:阿昔洛韋  分子式:5O3 

兔胱抑素C(rabbit Cystatin C)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝     5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  中文名:  分子式:C13H15N3O2
5-
甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))  5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate   質量規格:>98.0%(T) MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA試劑盒小鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規格:96T/48T

1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))  1,10-Phenanthroline-5,6-dione  質量規格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒 ,英文名: sCD30 ELISA Kit

TPP(=四卟啉)  TPP (=Tetraphenylporphyrin)   質量規格:銅用高靈敏分光光度試劑 大鼠D(VD)ELISA檢測試劑盒RatVitaminD,VDELISAKit 96T/48T

TCPP[=(4-)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))  TCPP [=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin]   質量規格:>97.0%(HPLC)(T) 人蛋白精甲基轉移酶1(PRMT1)試劑盒 Human PRMT1 ELISA Kit

偶氮甲堿H(>97.0%(T))  Azomethine H   質量規格:>97.0%(T) RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T

N-甲基糠酰羥肟酸(>99.0%(HPLC))  N-Methylfurohydroxamic Acid   質量規格:>99.0%(HPLC) GMS10細菌1毫升

2,2'-二辛可寧酸二鉀鹽水合物(>98.0%(HPLC))  2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate   質量規格:>98.0%(HPLC) MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA試劑盒小鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規格:96T/48T

氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))  Chloranilic Acid  質量規格:>98.0%(HPLC)(T) 小鼠顆粒體蛋白(GRN)ELISA試劑盒 ,英文名: GRN ELISA Kit

焦棓酚紅  Pyrogallol Red  質量規格:螯合劑 人腺苷酸環化酶1(AC-1)ELISA檢測試劑盒Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISAKit 96T/48T

鋅試劑  Zincon  質量規格:螯合劑 大鼠血栓前體蛋白(TpP)試劑盒 Rat thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
Fluo-4, AM(Ca2+ GPCR
分析-鈣離子指示探針)細胞CDK2/CYCLIN E激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織CDK2/CYCLIN A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞CDK2/CYCLIN A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織CDK1/CYCLIN B激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞CDK1/CYCLIN B激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C


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