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產品型號：200μL
更新時間：2025-10-31
廠商性質：經銷商
訪問量：287
服務熱線021-39596320
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DNA提取流程圖：
下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM | Fluo-3, AM | 200μL | GOY-F10178 |
產品詳細介紹：
Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士發明的鈣離子指示劑Fluo 系列之一，目前，Fluo-3 和Fluo-4 已成熟商品化。然而，Fluo-2 在細胞內比Fluo-4 要更明亮，主要可能是由于大部分細胞對FLuo-2 的加載能力要高于FLuo-4。 Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號通路的多個方面，Fluo-3 經常應用在流式細胞術上，如螯合劑光活化、第二信使、神經遞質以及細胞水平的藥理篩選。Fluo-3 在這些應用里之所以能大量運用主要是由于其幾個重要特性：Fluo-3 可以被氬離子激光器488nm 激發，并在與Ca2+結合后，發射熒光很明亮的熒光信號。Fluo-4 是Fluo-3 以兩個氟原子取代氯原子的類似物，這一微小的結構變化使得Fluo-4探針在488nm 激發光下的熒光信號得到增強，信號穩定持續，可以應用于共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、微孔板讀數儀。 Fluo-2、Fluo-3 和Fluo-4 在與Ca2+結合后熒光增強，與紫外激發的探針fura-2 和indo-1 不同，不會發生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結合后，增強至少100 倍。 儲存：-20℃，避光，有效期12個月。 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔鉤端螺旋體IgGelisa試劑盒 兔鉤端螺旋體IgG試劑盒 規格型號：96T/48T 兔鉤端螺旋體IgG試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔鉤端螺旋體IgG試劑盒、兔鉤端螺旋體IgG elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名： 分子式：C10H16N2O6S3 度：98.0%
兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISAKit 6-Benzyloxyindole 15903-94-3 中文名：6-芐氧基吲哚 分子式：C15H13NO
兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 154127-42-1 中文名： 分子式：C10H16N2O6S3
兔睪(rabbit TESTO) 作用： ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝 4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde 151103-08-1 中文名： 分子式：C8H6F2O3 度：98.0% 關鍵詞：
兔干細胞因子(rabbit SCF) 作用： ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝 4-Chlorotestosterone acetate 855-19-6 中文名：醋酸氯 分子式：C21H29ClO3 度：98.0% 關鍵詞：
十二烷基硫酸鋰 Lithium Dodecyl Sulfate 質量規格：>98%,分子生物學級 MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒規格：96T/48T
硫代甜菜堿 8 Sulfobetaine 8 質量規格：>98%,sigma分裝 小鼠顆粒酶B(GZMB)ELISA試劑盒 ，英文名： GZMB ELISA Kit
硫代甜菜堿 10 Sulfobetaine 10 質量規格：>98%,BR 人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA檢測試劑盒Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 96T/48T
硫代甜菜堿 12 Sulfobetaine 12,SDDAB 質量規格：>98%,BR 大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙?；D移酶(AANAT)試劑盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit
恩他卡朋;COMT抑制劑 Entacapone 質量規格：>99%,BR 英文名稱RatLBPELISAKit大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)規格：96T/48T
曲拉通X-114 Triton X-114 質量規格：BC 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20
曲拉通X-405 Triton X-405 質量規格：70% in H2O ELISAKitFree-T3人游離三甲狀腺原規格：48T/96T
CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸 CHAPS 質量規格：>98.5% 小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 ，英文名： Gzms-A ELISA Kit
CHAPSO；3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸 CHAPSO 質量規格：>99%,分子生物學級； 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測試劑盒RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T
二硫赤蘚(DTE)；1,4-二硫代赤蘚 1,4-Dithioerythritol 質量規格：>99%,進分sigma 人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)試劑盒 Human Protein Kinase C beta II,PKC-bII ELISA Kit
Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM組織C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織AMPK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
