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轉化細胞為什么會衰老?
關于轉化細胞衰老的機理具有許多不同的學說,概括起來主要有差錯學派(Errortheories)和遺傳學派(Genetic/Programmedtheories)兩大類,前者強調衰老是由于細胞中的各種錯誤積累引起的,后者強調衰老是遺傳決定的自然演進過程.其實,現在看來兩者是相互統一的。(一)差錯學派細胞衰老是各種細胞成分在受到內外環境的損傷作用后,因缺乏完善的修復,使“差錯”積累,導致細胞衰老.根據對導致“差錯”的主要因子和主導因子的認識不同,可分為不同的學說,這些學說各有實驗...
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人胚胎腫瘤細胞培養方法
腫瘤細胞為了能夠適用于醫學移植,人類胚胎干細胞(hESCs)需要保持一種“未分化”狀態,即它們沒有變換成其他類型的細胞。為了確定培養hESCs的方法能使它們保持未分化狀態,也能生長、增殖和存活,研究人員經常使用動物來源的血細胞“飼養層”,通常來自于小鼠(小鼠胚胎成纖維細胞MEFs)。然而,這種方法存在各種污染問題,包括病原體和病毒的傳播。為了避免污染問題,使用作為飼養層細胞,他們發現,MBMCs可以取代動物來源的飼養系統,用于培養人類胚胎干細胞,并能夠使它們成長在一個未分化的...
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怎樣開始腫瘤細胞重編程
腫瘤細胞環境有著超越基因組的影響,正因如此,大規模“組學"數據將是未來細胞重編程的一個重要方面。雖然我們認為iPSC和ESC在功能上是相同的,但轉錄組、蛋白質組和表觀基因組水平的深入研究將有助于闡明環境對重編程的影響。另外,在單個細胞中同時檢測多個“組學",將能鑒定那些造成iPSC多能性差異的基礎元件。目前,細胞重編程領域普遍缺乏定量數據。實際上,文獻中的重編程效率差異,可能更多的是由體細胞內部異質性造成的,而不是方法學上的問題。定量理解這樣的異質性,可以幫助我們從細胞群體中...
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干細胞和癌變細胞之間的差異
目前為止,干細胞這種磁共振成像(MRI)技術,只檢測試管中生長的細胞和小鼠,研究人員說:“我們認為,這是科學家們發現細胞黏菌成像的一種用法,當細胞發生癌變,其外膜上的一些蛋白質會脫落糖分子,并變得不黏滑,可能是因為它們擁擠的緊密結合在一起。如果我們調整MRI來檢測附著于特定蛋白質上的糖分子,我們就可以看到正常。此項研究是基于其他研究機構zui近的調查結果,表明通過一種微調MRI技術,根據這種指示葡萄糖與周圍水分子的*相互作用方式,可以檢測到它們,而不需要施用染料。其他研究人員...
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腫瘤細胞清洗與滅菌
一、腫瘤細胞實驗目的能獨立地進行用于細胞培養的各種器皿的清洗與消毒,掌握干熱滅菌法、濕熱滅菌法和濾過除菌法的操作,了解化學消毒法的使用方法。二、實驗原理清洗與消毒是組織培養實驗的*步,是組織培養中工作量zui大,也是zui基本的步驟。體外培養細胞所使用的各種玻璃或塑料器皿對清潔和無菌的要求程度很高。細胞養不好與清洗不*有很大關系。清洗后的玻璃器皿,不僅要求干凈透明,無油跡,而且不能殘留任何物質。如有毒的化學物質,哪怕殘留0.1個,也可能影響細胞生長。滅菌手段的選擇十分重要,對...
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腫瘤細胞培養遞送siRNA*方法
由于腫瘤細胞使用RNAi技術可以特異性剔除或關閉特定基因的表達,所以該技術已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的基因治療領域。而siRNA轉染途徑也是一種常用的RNAi技術,那么本文在此介紹向培養細胞遞送siRNA的*化方法。以下的所有建議適用于siRNA,確切地說,同樣可用于遞送siRNA模擬物/抑制劑。(1)進行實驗時要保持一致條件優化后,應注意確保操作中每一步的順序、時間和方式一致。整個實驗中變動因素越少,實驗結果的可重復性及可靠性越高。(2)轉染時選擇恰當的...
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綠色木霉對ATCC細胞有何作用?
【方法】ATCC細胞用海藻酸鈉和氯化鈣固定綠色木霉,將游離綠色木霉和固定化綠色木霉分別培養一段時間,離心培養液,用分光光度計法檢測上清液中纖維素酶活性。在上清液中加入濃縮的小球藻懸浮液,用顯微鏡計數細胞壁破碎的小球藻。【結果】綠色木霉能同時分泌內切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶及β-1,4葡萄糖苷酶3種纖維素酶,其中外切葡聚糖酶活性zui高。固定化綠色木霉反復使用5次后,分泌的纖維素酶活性能保持到初次的67.4%。市售纖維素酶、游離綠色木霉、固定化綠色木霉初次及第5次分解小球藻細胞壁...
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誘導性干細胞定向分化
日本學者山中伸彌將oct4、Sox2、Klf4、c-myc四個基因插入到成體干細胞DNA中重編程細胞恢復到胚胎干細胞狀態,由此建立了iPS細胞。這些細胞可以向胚胎干細胞一樣,轉變為幾乎所有的組織類型。為此,山中伸彌在2011年獲得諾貝爾獎。雖然iPS細胞有潛力發育為任何組織器官,但如何誘導它們往正確的方向分化問題尚未解決。由中科院上海生命科學院/上海交大醫學院健康科學研究所金穎教授帶隊的關于“基于誘導多能干細胞技術的若干重大疾病模型與機理研究”的“973”科技部重大科學研究項...
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口腔干細胞活性Z強可以保護乳牙
專家發現,乳牙中含有的干細胞是間充質干細胞,而間充質干細胞在醫學界對其價值早有肯定,從2010年~2015年的數年間,醫學雜志中刊載有諸如“脫落乳牙干細胞和骨髓干細胞改善了紅斑狼瘡小鼠模型的骨密度和骨結構,抑制了骨質疏松的發生。”“對比人脫落乳牙干細胞和骨髓干細胞發現,脫落乳牙干細胞具有遠優于骨髓干細胞的免疫調節能力”“牙齒干細胞的免疫調節特性使其成為自身免疫疾病和炎癥相關疾病細胞治療的重要干細胞來源,其獲取遠比骨髓干細胞容易”等多種理論。2011年,翟永標、凌均棨也在《口腔...
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干細胞驚人異質性
干細胞能夠無限增殖,也能分化和發育為數百種不同細胞和身體組織的任何種類,這種多能性使得干細胞具有巨大的生物醫學工程學潛力。然而直到現在人們都難以確定整個細胞變化狀態過程干細胞發育調控的復雜性。利用強大的新型單細胞遺傳分析技術,揭示出多能干細胞的變化遠比以前所認識的要多得多。使得研究人員朝著某天能夠將多種不同類型的干細胞應用于疾病治療和再生治療又近了一步。在干細胞群中單個細胞之間具有很大的差異。一直以來它都被視作是開發可預測的干細胞工程學方法中存在的一個問題。現在,我們發現人們...
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轉化細胞培養液的成分分析
轉化細胞培養液的成分:體外細胞培養所需營養物質與體內基本相同,例如,需要糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基,稱為合成培養基。由于動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內的環境,因此在使用合成培養基時,通常需加入血清、血漿等一些天然成分。1、動物細胞培養液的特點:液體培養基、通常含動物血清。2、動物細胞培養的條件:①無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌...
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培養干細胞的凍存
干細胞低溫凍存是培養室常規工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。1.凍存細胞(1)選對數增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液。(2)按常規方法把培養細胞制備成懸液,計數,使細胞密度達5×107/ml左右密度,離心,去上清。(3)加入配制好的凍存液(培養液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO1ml,5.6%NaHCO30.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細...
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